在菌丝生长期，如果水分不足，菌丝生长缓慢，子实体难于形成，甚至死亡；但是水分过多，则会通气不良，影响呼吸作用，造成烂菇和死菇。所以，要掌握适宜的水分和空气相对湿度，草菇培养料的含水量一般在70%一75010，菌丝体生长阶段空气的相对湿度为70%．子实体生长阶段为85%—95%之间为宜。若湿度长期处于95%以上，子实体容易腐烂，引起杂菌和病虫繁殖，小菇蕾萎缩死亡。如果空气相对湿度低于60%，子实体会停止发育。当空气相对湿度降至40%—50%时，子实体便不再分化，即使已分化出来的小菇蕾也会枯死。
培养料所含的水是草菇所需水分最重要的来源。当培养料中的水分由于蒸发和菌丝体吸收而减少时，应注意采取适当的方法给予及时地补充。过高的空气相对湿度还会阻碍菇体的蒸腾作用，严重影响细胞原生质的流动和营养物质的运输。
基稀含水率，大多要求调至65%左右，在黏性较重的床基上，可调基料含水率在65%一680/0，在壤土床基上则需要调至70% ~75%，沙性偏大时可超过75%。
